BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白浓度的原理及特点

　　本生阐述：BCA 蛋白浓度测定试剂盒原理：

　　BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。，二价铜离子在碱性的条件下，可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction)，一价铜离子的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子，形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

　　BCA 蛋白浓度测定试剂盒的特点：

　　1.步骤简单，45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。

　　2.灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl 。

　　3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween-20, 60, 80。

　　4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。

　　5. 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。

　　注意事项：

　　1.长期不用时，Cu试剂与PBS稀释液可置于2-8℃保存，如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时，可37℃温育使其溶解, 不影响使用。

　　2.样品中若含有较多干扰物质时，请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

　　3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

　　4. 常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT，巯基乙醇)和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用考马斯亮蓝(Bradford)蛋白浓度测定试剂盒。

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