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实验方法:实验中缓冲液配制操作简要流程
更新时间:2023-03-30浏览:522次

  实验方法:实验中缓冲液配制操作简要流程
 

  定义:

  缓冲溶液指的是由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。

  以常用的PBS磷酸缓冲溶液(不含钙、镁离子)为例,简述配制流程。

  实验材料:

  NaCl

  Na2HPO4

  KCl

  KH2PO4

  Mili-Q水

  HCl

  电子天平

  高温高压蒸汽灭菌锅

  PH计

  巴氏吸管[NEST]

  PETG方形试剂瓶[NEST]

  试剂配方:

  NaCl 8.00g + Na2HPO4 1.15g + KH2PO4 0.20g + KCl 0.20g + 1L Mili-Q水= 1 × PBS

  实验中缓冲液实验流程:

  根据配制需求计算需要使用的试剂量,用电子天平分别称取对应重量的试剂,在烧杯中混合,加入800 mL Mili-Q水,用玻璃棒或磁力搅拌器充分溶解。

  待溶液澄澈透明无杂质,再加入200 mL Mili-Q水定容至1 L,用巴氏吸管吸取HCl调节缓冲液PH值在标准范围内。

  将配制完成的PBS缓冲溶液移入高温高压蒸汽灭菌锅内,121℃灭菌30min。

  灭菌完成后,在超净工作台按需求分装入PETG方形试剂瓶内,4℃条件下保存备用。

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