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本生提醒您:做ELISA标准曲线时需要注意哪些问题
更新时间:2023-05-06浏览:701次

  本生提醒您:做ELISA标准曲线时需要注意哪些问题


  做ELISA实验的老师们都知道ELISA标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。今天小编就和大家一起来看下我们在做ELISA标准曲线时需要重点注意的细节问题。

  1. 设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度*陡段,即曲线几乎成直线的范围内。


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  2.检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。

  3.标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。

  4.做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。

  5.样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。

  6.采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

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