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糖原磷酸化酶b(GPb)活性检测试剂盒实验原理
更新时间:2024-01-23浏览:375次

  糖原磷酸化酶b(GPb)活性检测试剂盒


  红蛋白定性检测试剂盒

  储存条件:-20℃

  有效期:6个月

  推荐:若使用96孔板测定,需使用96孔UV板

  英文名称:Glycogen Phosphorylase b (Gpb) Activity Assay Kit

  别名:糖原磷酸化酶b试剂盒 GPb Kit 糖原磷酸化酶b(GPb)试剂盒 糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒

  检测方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

  单位:盒

  规格:100T/48S

  实验原理:糖原磷酸化酶是糖原分解代谢中的关键酶,催化糖原的磷酸化反应。该酶分为有活性的糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a, GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(Glycogen phosphorylase b, GPb)两种形式。糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a的催化下进行。未添加激活剂时,糖原磷酸化酶a催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映糖原磷酸化酶a活性。添加激活剂测定GP(GPa和GPb)总活性,未添加激活剂时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。

  溶液的配制:

  1、试剂二: 临用前加入 0.5 mL 蒸馆水,充分混匀;

  2、试剂三:临用前加入 0.5mL 蒸馅水,充分混匀,可分装后-20°C保存 4周,避免反复冻融;2、

  3、试剂四:临用前加入 1.25 mL 蒸馆水,充分混匀:可分装后-20°C保存 4周,避免反复冻融

  4、试剂五:临用前每支加入1mL 蒸留水,充分混匀:可分装后-20%C保存 4周,避免反复冻融:一支即可做 100T,为延长试剂盒使用时间故多给一支。

  5、试剂六: 临用前每支加入1m 蒸馏水,充分混匀:可分装后-20C保存 4周,避免反复冻融:一支即可5做 100T,为延长试剂盒使用时间故多给一支。

  6、试剂七:临用前加入2mL 蒸馏水,充分混匀,可分装后-20°C保存4周,避免反复冻融;

  7、 工作液的配制:临用前根据实验所需用量,按照试剂一:试剂二: 试剂三: 试剂四 =148L:4L:4L:4uL,(1T 的量) 的比例,充分混匀,现用现配.

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