服务热线:
15502280048
技术支持

您现在的位置:首页  >  技术文章  >  酶联免疫吸附测定(ELISA)原理

酶联免疫吸附测定(ELISA)原理
更新时间:2025-05-19浏览:116次

  酶联免疫吸附测定(ELISA)原理

  酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种基于抗原-抗体特异性结合与酶催化显色的免疫检测技术,其核心原理可分为以下关键步骤:

  一、固相载体包被

  抗原/抗体固定化‌

  将已知抗原或抗体吸附于固相载体(通常为聚苯乙烯微孔板)表面,并保持其免疫活性

  封闭处理‌

  使用无关蛋白(如BSA)封闭未结合位点,减少非特异性结合


638205460177361188202.jpg


  二、特异性结合反应

  样本孵育‌

  加入待测样本,目标分子(抗原或抗体)与固相载体上的对应结合物形成免疫复合物

  洗涤分离‌

  通过多次洗涤去除未结合的游离成分,确保反应特异性

  三、酶标记与信号放大

  酶标二抗/抗原‌

  加入酶标记的抗体或抗原(如HRP标记),与目标分子特异性结合

  催化显色‌

  加入底物(如TMB)后,酶催化底物产生有色产物,颜色深浅与目标物浓度成正比

  四、检测与定量

  光学测量‌

  使用酶标仪测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算目标物浓度

  灵敏度优势‌

  酶的高效催化作用可放大信号,检测限可达皮摩尔级别

  常见方法类型

  类型 特点 适用场景

  直接法‌ 酶标一抗直接结合抗原,步骤简单但灵敏度较低 单一抗原检测

  间接法‌ 使用酶标二抗放大信号,提高灵敏度 抗体检测(如血清学)

  夹心法‌ 需两种特异性抗体分别捕获和检测抗原,特异性最高 复杂样本中的微量抗原

  注:以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师或供应商。

  注:实际应用中需根据检测目标选择方法类型,并优化包被浓度、封闭条件等参数。以上资料仅供参考具体请咨询技术老师或供应商。

  天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。天津本生试剂盒

本生(天津)健康科技有限公司 版权所有    备案号:津ICP备19006588号-1

技术支持:化工仪器网    管理登陆    网站地图

联系电话:
18502669006

微信服务号