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植物提取试剂盒使用方法
以下是常见植物提取试剂盒的使用方法及注意事项,涵盖DNA、RNA及蛋白类样本的提取流程:
一、DNA提取(离心柱法)
样本预处理
液氮研磨新鲜组织(100-200mg)或干燥组织(50-100mg)至细粉状
多糖多酚样本需额外加入沉淀溶液去除杂质
裂解与纯化
加入裂解缓冲液(如Buffer HB)和Proteinase K,50℃裂解30分钟
离心后取上清,加入沉淀缓冲液(Buffer PB)冰浴10分钟
柱纯化
转移至吸附柱,依次用去蛋白液和漂洗液洗涤
低盐缓冲液(Buffer EB)洗脱DNA
二、RNA提取(硅胶柱法)
裂解阶段
液氮研磨后加入含巯基乙醇的提取液,65℃水浴裂解
酸酚(pH4.5)抽提去除蛋白
沉淀与纯化
加入LiCl溶液4℃沉淀过夜
硅胶柱吸附RNA,乙醇洗涤后DEPC水洗脱
三、植物ELISA试剂盒操作
样本制备
匀浆后离心取上清,避免多糖干扰
检测流程
标准品与样本同步孵育,洗涤后加入酶标二抗
显色后酶标仪读取OD值,绘制标准曲线计算含量
四、通用注意事项
防污染:RNA操作需全程使用RNase-free耗材
温度控制:裂解和孵育需严格控温(如65℃水浴)
试剂添加:漂洗液等需按比例加入无水乙醇
规格推荐:
植物提取试剂盒 填料
DNA提取试剂盒(MAXI) 50rxn600μl
DNA提取试剂盒(STD) 100rxn300μl
DNA提取试剂盒(MINI) 100rxn100μl
DNA快检提取试剂盒 500rxn50μl
注:不同品牌试剂盒步骤可能存在差异,需以说明书为准。以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师或供应商。
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