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琼脂糖电泳常见问题及解决方案
以下是琼脂糖电泳常见问题及解决方案的总结:
一、条带异常问题
条带模糊/拖尾
原因:DNA降解、缓冲液陈旧或上样过量
解决:
使用新鲜缓冲液(TAE/TBE),避免反复使用;
减少上样量(每孔≤10μL),避免超载;
检查核酸酶污染,确保样品纯度。
条带扭曲或"笑脸型"
原因:电场不均、梳子拔出不当或胶体凝固不均
解决:
预电泳5分钟(低电压)平衡电场;
垂直缓慢拔梳子,避免孔变形。
Marker条带不清晰
原因:胶浓度不合适或染料分布不均
解决:
调整胶浓度(0.8%-2%按片段大小选择);
改用泡染法(如GelRed后染色)。
二、电泳过程问题
DNA迁移异常
电压过高:>10V/cm易致条带扩散,建议5-8V/cm;
缓冲液错误:避免用自来水或高浓度母液,需1×TAE/TBE。
凝胶漂浮或缓冲液不流动
原因:冷却泵故障或密封不良
解决:检查设备密封性,调整蠕动泵速度。
三、其他关键问题
无条带显示
原因:电极接触不良、DNA未染色或样品降解
解决:检查电极连接,确认染料活性。
背景荧光高
原因:胶体杂质或紫外曝光过久
解决:过滤琼脂糖溶液,缩短紫外观察时间。
拖尾现象
原因:DNA结合蛋白或盐分污染
解决:酚/氯仿纯化样品,乙醇沉淀去盐。
四、预防性建议
制胶:微波加热琼脂糖至透明,冷却至60℃再加染料;
维护:每次使用后蒸馏水冲洗电极,避免盐结晶腐蚀;
保存:Marker需-20℃避光保存,避免反复冻融。
通过规范操作与针对性调整,可显著提升电泳结果质量。
BS-300 基础性电泳仪电源
BS-600C 通用型电泳仪电源
BS-mini01 垂直电泳槽(双板)
BS-mini04 垂直电泳槽(四板)
BS-ZY03 转印电泳槽(WB双板和铂乐通用)
BS-ZY04 转印电泳槽 (WB四板)
BS-sub02 琼脂糖电泳槽
注:以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师。
琼脂糖电泳 天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。