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elisa实验中洗板的目的是什么
以下是ELISA实验中洗板操作的关键注意事项,综合多来源信息整理:
一、洗涤液处理
新鲜配制
洗涤液需现配现用,避免絮状物堵塞洗板机喷头或造成花板现象。
推荐使用去离子水/蒸馏水稀释浓缩液,吐温20浓度控制在0.05%-0.2%(过高会解吸附抗体)。
温度控制
冬季需保持洗液温度20-30℃,低温易导致洗涤不净。
二、手工洗板要点
操作规范
加液量以刚满反应孔为限(约200-300μL),避免孔间交叉污染。
甩板时需垂直翻转120-150度,迅速干脆,禁止手腕摇摆旋转。
拍干技巧
使用无碎屑滤纸(非卫生纸),每次拍打更换区域,最后一次需拍干。
力度适中:过轻残留多,过猛可能损坏板条。
三、洗板机使用
参数设置
洗涤量350μL/孔,浸泡30-60秒,洗板4-5次(根据说明书调整)。
需检查喷头通畅性,残留量应≤1μL/孔。
补充处理
机洗后建议人工补洗1-2次,减少液体残留。
四、通用注意事项
防止污染
高浓度样本孔与空白孔需间隔布局,甩液时优先处理低浓度孔。
洗板前两遍需特别注意防溢。
时间控制
每步洗涤静置1-2分钟,总洗涤时间不足会导致背景偏高。
板面维护
保持酶标板湿润,避免孔内干涸导致酶失活。
五、错误操作警示
禁止:减少洗涤次数、缩短浸泡时间、重复使用吸水纸、混用不同品牌洗液。
避免:洗板后长时间暴露空气(显色OD值会衰减)。
通过规范操作可显著降低背景干扰,提高数据准确性。若出现花板现象,建议检查洗液新鲜度及温度。
注:以上资料仅供参考,完整操作请以实说明为准,不同品牌可能存在细节差异。
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