酶标条正确使用方法的详细指南

　　以下是关于酶标条正确使用方法的详细指南，结合实验操作关键步骤和注意事项：

　　一、酶标条的拆装与方向控制

　　拆装技巧‌

　　拆卸‌：从板条正面两端轻轻向上掰动后抠取，严禁单侧强行掰取，避免断裂‌。

　　安装‌：注意板条两端的方形和半圆形设计，半圆端需对准板框凸起卡槽，装反可能导致密封不严或检测误差‌。

　　固定‌：装入后需按压两侧和中间部位，确保板条压实，避免液体渗漏‌。

　　方向标识‌

　　酶标板通常标有字母(A-H)和数字(1-12)定位孔位，操作时需将板条缺口对准右上角放置‌。

　　二、液体处理与拍干操作

　　加样与拍干‌

　　加样后需垂直向下拍打酶标板，保证液体甩干程度一致。斜角拍打会导致受力不均，影响结果‌。

　　使用振荡器时，需单手按住板子调节档位，避免液体分布不均影响吸光度读数‌。

　　洗涤注意事项‌

　　手工洗涤时需用去离子水清洗加样槽，防止HRP酶污染;洗板机清洗建议5次，确保残留物去除‌。

　　三、实验流程关键步骤

　　显色与终止‌

　　TMB显色液需现配现用(A/B液等比例混合)，每孔加90-100μl，避光孵育15分钟(37℃)。显色过度时可提前终止‌。

　　终止液(如50μl/孔)加入后颜色由蓝变黄，需10分钟内完成450nm吸光度检测‌。

　　读数设置‌

　　酶标仪波长通常设为450nm，若仪器支持，可附加570nm或630nm校正波长以减少非特异吸收‌。

　　四、常见问题与维护

　　故障处理‌

　　读数异常时需检查滤光片设置、光源清洁度，或重新校准仪器‌。

　　背景过高可能是封闭不充分或洗涤不净，需优化封闭时间和洗涤次数‌。

　　储存条件‌

　　未使用的酶标条需密封避光保存(2-8℃)，避免受潮或暴露失效‌。

　　通过规范操作和细节控制，可显著提升实验结果的准确性和重复性。

　　注：以上资料仅供参考，实验前建议通过小样测试验证膜性能‌。

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