Elisa实验：稀释标准品实验步骤

　　以下是ELISA实验中标准品稀释的详细步骤总结，综合多个实验操作视频的关键步骤：

　　一、标准品稀释前准备‌

　　试剂与耗材‌

　　7支空白EP管(编号S0-S6)

　　标准品样本稀释液(如1x PBS或说明书指定缓冲液) 本生试剂盒

　　涡旋振荡器、移液器(建议10-100μL和100-1000μL规格)

　　标准品活化‌

　　冻干标准品需先离心1-2分钟使粉末集中管底

　　加入指定体积蒸馏水(如200μL)，涡旋混匀5秒，静置10-30分钟至溶解

　　二、标准品稀释步骤‌

　　初始稀释‌

　　在S6管中加入500μL标准品样本稀释液

　　吸取溶解后的标准品母液500μL加入S6管，涡旋混匀5秒

　　倍比稀释‌

　　从S6管取500μL加入S5管，混匀

　　重复上述步骤至S1管，S0管仅含稀释液(空白对照)

　　关键点：每次稀释需充分混匀，避免浓度误差

　　特殊处理‌

　　高浓度标准品(如血清样本)需酸化处理：加盐酸20μL混匀，孵育10分钟后加氢氧化钠20μL终止

　　三、稀释后操作‌

　　分装与保存‌

　　现配现用，避免反复冻融

　　分装体积建议：50μL/孔(酶标板使用)

　　质量控制‌

　　检查各管液体混匀状态，避免沉淀

　　酸化样本需20倍稀释后使用

　　四、常见问题规避‌

　　错误示例‌：未充分混匀导致梯度不线性

　　解决方案‌：使用排枪或自动移液器降低操作误差

　　(注：具体稀释比例需根据试剂盒说明书调整，不同厂家标准品浓度可能差异较大)

　　注：以上资料仅供参考，具体产品信息请咨询技术老师或品牌供应商。

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