如何正确操作HLB固相萃取柱?

　　以下是HLB固相萃取柱的标准操作流程及关键注意事项：

　　一、预处理与活化‌

　　甲醇活化‌

　　加入6mL甲醇缓慢润湿填料(流速≤1mL/min)，确保柱床渗透。

　　目的：去除杂质并激活疏水基团，同时避免筛板疏水导致的水润湿失败。

　　水平衡‌

　　用3-6mL超纯水或缓冲液冲洗，替换甲醇环境，建立亲水疏水平衡。

　　二、上样与清洗‌

　　样品加载‌

　　将预处理后的样品(建议pH 2-8)以1mL/min流速通过柱子。

　　高盐样品需稀释或添加缓冲液改善流动性。

　　杂质清洗‌

　　用5%甲醇水溶液或缓冲液冲洗，去除极性杂质(如盐类)。

　　三、洗脱与干燥‌

　　目标物洗脱‌

　　用2-5mL甲醇或乙腈分次洗脱，收集洗脱液(回收率≥95%)。

　　柱体维护‌

　　使用后立即用甲醇冲洗保存，避免填料干涸。

　　四、关键注意事项‌

　　流速控制‌：全程保持≤1mL/min以确保充分接触。

　　防干涸‌：活化后柱床必须湿润，干燥会导致吸附效率下降。

　　溶剂兼容性‌：避免强氧化剂或pH(超出pH 1-14范围)。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实验数据，具体请咨询品牌供应商或技术老师;

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