elisa试剂盒加入终止液后没有立即测定影响大吗?

　　在ELISA实验中，加入终止液后未立即测定可能会对结果产生一定影响，具体取决于以下几个因素：

　　1. 终止液的作用

　　终止液)的作用是终止酶(如HRP)与底物(如TMB)的反应，使显色反应停止。一旦终止液加入，颜色会迅速稳定(如TMB从蓝色变为黄色)。

　　2. 延迟测定的潜在影响

　　颜色稳定性：大多数ELISA试剂盒(如TMB底物体系)在终止后颜色可稳定数小时(通常2-4小时，具体参考说明书)。但长时间放置(如超过24小时)可能导致吸光度(OD值)略微下降或背景升高。

　　环境因素：如果板子暴露在强光或高温下，可能加速颜色变化，导致结果偏差。

　　特殊底物：某些底物(如OPD)在终止后稳定性较差，需尽快检测。

　　3. 建议操作

　　立即测定最佳：大多数说明书建议终止后10-30分钟内完成读数，以确保准确性。

　　短期延迟(1-2小时)：若无法立即检测，可将反应板避光保存于室温(避免低温导致沉淀)，通常影响较小。

　　长期延迟：如需长时间保存，建议先读取数据后再存档样本，避免依赖延迟测定。

　　4. 验证方法

　　如果不确定影响程度，可进行对比实验：

　　立即测定一组孔，延迟测定另一组(如1小时、2小时后)，观察OD值变化趋势。

　　结论：短时间延迟(如1小时内)通常影响不大，但应尽量按说明书要求操作，避免人为误差。若延迟较久，需评估试剂盒的稳定性或优化实验流程。

　　注：以上资料仅供参考，如需具体品牌试剂盒的完整说明，可咨询技术老师或品牌供应商的详细文档。

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