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选择一款合适的96孔PCR板。不同的实验目标、仪器和流程对耗材有着截然不同的要求。选错板子可能导致信号微弱、重复性差、甚至实验失败。本指南将带您一步步完成精准匹配,确保您的qPCR实验结果可靠无误。
第一步:明确核心实验类型——这是选择的基础
您的实验应用直接决定了所需板子的首要特性。
标准定量PCR (qPCR):
关键需求:良好的光学透明度和密封性。
推荐:透明板或白色板均可。如需更高灵敏度和抗串扰能力,白色板是优选。
高灵敏度检测(如低丰度基因、单细胞测序):
关键需求:信号采集,最小化背景噪音。
推荐:白色板选择。其白色壁/底能有效反射荧光信号,显著提升信噪比和检测灵敏度。
快速PCR / 高速循环:
关键需求:热传导效率,确保孔间温度一致。
推荐:选择明确标注 “超薄壁" 的板子,以实现最快的升降温速率。
高通量筛查、基因分型:
关键需求:避免样本交叉污染,适应自动化工作站操作。
推荐:选择带有全裙边的板子,机械强度高,便于机械臂抓取。同时必须确保密封性绝对可靠。
第二步:匹配您的qPCR仪器——这是“专用"的关键 本生96孔PCR板
这是最关键的一步,不兼容会导致仪器无法识别或检测失败。
光学系统:
从顶端读取光信号的仪器(如ABI QuantStudio系列, Roche LightCycler® 480):必须使用透明盖或光学密封膜。
从底部读取光信号的仪器(如Bio-Rad CFX系列, Eppendorf Realplex):必须关注板底材质。
白色板底:增强荧光信号,减少孔间串扰,适用于绝大多数实验,是通用且高性能的选择。
透明板底:透光性最好,但可能产生更多串扰。适用于需要高透光率的特殊应用。
仪器型号:
严格兼容性:许多仪器有“专用"板(如Roche 480专用板)。购买前务必在产品说明中确认 “[您的仪器型号]"。
物理尺寸:确保板子的高度、裙边设计能严丝合缝地放入您仪器的样品槽中。
第三步:详解关键性能参数——看懂产品说明
材质:
聚丙烯 (PP):主流材质,需为超高纯度PCR级,确保无DNA酶、RNA酶、人类基因组DNA污染,且不会抑制PCR反应。
裙边类型:
无裙边:便宜,但机械强度弱,易弯曲,主要用于手工操作。
半裙边:周边有一圈凸起,便于标记和拿取,提供一定机械强度。
全裙边:坚固,适合自动化操作,可嵌入条形码进行样品追踪。
密封方式:
光学平盖:一次性使用,与白色板搭配是黄金标准,提供最佳光学性能和密封性。
光学密封膜:需配合压膜器使用,密封性好,适用于高通量应用。
凸盖/圆盖:可重复使用,密封性不如平盖和膜,有蒸发风险,不推荐用于精密定量实验。
第四步:特殊考量
无菌 & 无酶:大多数商业PCR板已保证无DNase/RNase。如果实验对污染极度敏感(如NGS建库),可选择经认证预灭菌(如伽马射线)的产品。
预制孔板:有些板子出厂时已预置了ROX等被动参比染料,专为需要染料校正的仪器系统(如部分ABI机型)设计,购买时需注意区分。
快速选择流程图
开始 → 您的qPCR仪器型号是什么? → 选择该仪器兼容的板型
↓
您的实验需要高灵敏度吗? → 是 → 选择白色板 + 光学平盖/密封膜
↓
否 → 透明板亦可
↓
您使用自动化工作站吗? → 是 → 选择全裙边设计
↓
否 → 半裙边或无裙边即可
↓
您的实验周期非常短吗? → 是 → 确认选择“超薄壁"
↓
结束 → 确认订单!
总结
为实验精准匹配96孔PCR板,只需遵循以上四步:
定应用(灵敏度 通量 )
对仪器(光路 型号 )
看参数(材质 裙边?密封 )
查特殊(无菌 预置染料 )
注:以上资料仅供参考,具体其他信息请咨询技术老师或品牌供应商。
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