ELISA实验中，‌终止液‌是确保实验数据准确性和可靠性的关键试剂，其重要性主要体现在以下方面：

　　一、终止液的核心作用‌

　　终止酶促反应‌

　　通过强酸性环境(如2mol/L H₂SO₄)破坏HRP酶的活性，立即停止显色反应，防止底物(如TMB)过度转化导致信号失真‌。

　　稳定显色产物‌

　　将蓝色阳离子根(TMB氧化产物)转化为黄色联苯醌，并在450nm处形成稳定吸收峰，便于酶标仪准确读取OD值‌。

　　控制反应时间‌

　　加入终止液后需在30分钟内完成检测，避免显色产物分解或颜色衰减导致数据偏差‌。

　　二、终止液对实验结果的影响‌

　　未加终止液的后果‌

　　反应持续进行会导致：

　　OD值随时间升高，无法准确反映初始浓度差异‌。

　　不同检测孔的读数因时间差异而不可比‌。

　　最佳操作规范‌

　　每孔添加50μL终止液(标准用量)，确保反应一致性‌。

　　三、安全与质量控制‌

　　安全操作‌：含强酸成分，需在通风橱中操作并佩戴防护装备‌。

　　质控标准‌：空白孔OD值应<0.1，否则提示试剂污染或操作失误‌。

　　四、应用场景扩展‌

　　终止液已纳入职业卫生检测标准(如GBZ 57—2019)，用于变应原特异性IgE抗体测定‌，并在转基因研究(如Bt蛋白检测)中确保定量准确性‌。

　　五、注意事项‌

　　时效性‌：加入终止液后需立即检测，放置超过30分钟可能导致OD值下降(阳性样本)或升高(阴性样本)‌。

　　储存条件‌：2-8℃避光保存，有效期通常为12个月‌。

　　通过规范使用终止液，可显著提升ELISA实验的重复性和数据可靠性‌。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实验依据，如果其他具体信息请咨询技术老师或品牌供应商。

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