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ELISA试剂盒酶标板孵育时间介绍
ELISA试剂盒酶标板孵育时间需根据试剂盒类型和实验要求调整,具体如下:
一、常规孵育时间参考
国内试剂盒
通常为 37℃孵育30分钟至1小时,低于1小时可能影响检测下限。
进口试剂盒
推荐 37℃孵育1-2小时,以确保抗原抗体充分结合。
二、关键影响因素
温度与时间关系:温度越高,所需时间越短(如37℃需1小时,4℃可能需过夜)。
实验类型差异:
夹心法ELISA需更长时间(如2小时)以确保捕获抗体与抗原结合。
竞争法ELISA可能缩短孵育时间(需参考具体试剂盒说明)。
三、操作建议
预实验优化:若结果不稳定,可延长孵育时间至2小时或调整温度。
避免误差:
确保孵育箱温度均匀,避免边缘孔受热不均。
显色前充分洗涤(3-5次),减少非特异性结合干扰。
四、特殊案例
包被抗原实验:4℃过夜孵育(12-16小时)可增强结合稳定性。
细胞培养上清检测:37℃孵育1小时后需结合封闭步骤(如1% BSA封闭1小时)。
注:以上资料仅供参考,不作为实验依据,具体产品说明请咨询品牌供应商或技术老师。
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