ELISA与Western Blot实验的区别

　　一、基本原理与核心差异

　　ELISA(酶联免疫吸附试验)‌

　　基于抗原-抗体特异性结合，通过酶

　　标记信号放大(如HRP催化显色)实现检测，通常使用96孔聚苯乙烯酶标板作为固相载体‌。

　　适用于溶液样本(如血清、细胞培养上清)的定量分析，灵敏度高且可高通量操作‌。

　　Western Blot(蛋白质免疫印迹)‌

　　需先通过SDS-PAGE电泳分离蛋白质，再转印至固相膜(如PVDF膜)，通过抗体结合和化学发光/显色检测目标蛋白‌。

　　可提供蛋白质分子量信息，适用于定性或半定量分析，尤其适合研究翻译后修饰‌。

　　二、操作流程对比

　　步骤‌ ‌ELISA‌ ‌Western Blot‌

　　样本处理‌ 直接检测液体样本，无需电泳 需提取蛋白并电泳分离‌

　　检测方式‌ 酶标仪读取吸光度(OD值) 化学发光/显色成像系统‌

　　耗时‌ 数小时(快速) 1-2天(复杂)‌

　　三、应用场景选择

　　ELISA优先‌：

　　需高精度定量(如细胞因子浓度测定)‌。

　　高通量筛选(如药物开发中的抗体检测)‌。

　　Western Blot优先‌：

　　需分析蛋白质分子量或翻译后修饰‌。

　　验证蛋白质表达水平(如基因敲除效果)‌。

　　四、技术局限性

　　ELISA‌：无法区分蛋白质亚型或修饰，依赖抗体特异性‌。

　　Western Blot‌：定量误差较大，操作复杂且通量低‌。

　　五、总结

　　ELISA与Western Blot虽均基于免疫反应，但ELISA以定量见长，Western Blot以定性分析为优，选择时需结合实验目的(定量/定性)、样本类型及设备条件综合判断‌。

　　注：仅供科研使用，以上资料供参考，如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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