如何正确使用冻存管进行细胞冻存?

　　以下是细胞冻存管使用的关键步骤与注意事项，结合实验室标准操作流程：

　　1. ‌冻存前准备‌

　　细胞状态‌：选择对数生长期(融合度80%-90%)的细胞，复苏后两周内冻存效果佳。

　　冻存液配制‌：

　　含血清冻存液‌：培养基与血清比例通常为1:1(难培养细胞可提高血清比例)，需搭配程序降温盒使用‌。

　　无血清冻存液‌：可直接使用商品化冻存液(如逸漠生物、普美品牌)，无需梯度降温‌。

　　冻存管选择‌：2mL冻存管建议装1mL细胞悬液，避免体积过大导致冷却不均‌。

　　2. ‌细胞处理与分装‌

　　消化与离心‌：胰酶消化后，800-1200rpm离心5分钟，弃上清保留细胞沉淀‌。

　　重悬分装‌：加入预冷冻存液轻柔吹打，分装至冻存管并标记细胞名称、日期‌。

　　3. ‌降温与保存‌

　　梯度降温‌(含血清冻存液适用)：

　　4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存‌。

　　直接冻存‌(无血清冻存液适用)：分装后直接放入-80℃冰箱，24小时后转移至液氮‌。

　　4. ‌关键注意事项‌

　　防爆管‌：液氮保存时优先选择内旋盖冻存管，避免液氮渗入导致爆管。

　　复苏验证‌：冻存后需复苏验证细胞活性，-80℃保存不超过半年。

　　扩展资源‌：

　　含血清冻存液需定期更换异丙醇(程序降温盒内)‌。

　　悬浮细胞冻存需调整离心参数(如1000rpm)。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!本生试剂盒