酶联免疫ELISA实验标准品稀释操作流程

　　ELISA标准品稀释操作流程 天津本生试剂盒

　　一、标准品溶解

　　离心处理‌：将冻干标准品短暂离心(6000-10000rpm，30秒)，使管壁残留粉末沉至管底‌

　　溶解操作‌：按说明书加入指定体积的蒸馏水或样本稀释液，室温静置10-30分钟溶解，避免立即吹打

　　混匀要求‌：溶解后涡旋振荡或轻柔吹打混匀，形成原液(如S7浓度2000 pg/mL)‌

　　二、梯度稀释方法

　　准备离心管‌：标记8个1.5mL离心管(S0-S7)，S0管加入250μL样本稀释液作为空白对照‌

　　倍比稀释步骤‌：

　　取250μL原液加入S6管，吹打混匀10次

　　从S6管转移250μL至S5管，同法操作至S1管

　　最终浓度梯度：2000→1000→500→...→31.25 pg/mL‌

　　三、关键注意事项

　　稀释液选择‌：血清/血浆样本需使用试剂盒配套稀释液，避免基质干扰

　　操作规范‌：大比例稀释(如200倍)建议分步进行(先10倍再20倍)‌

　　现配现用‌：生物素标记抗体等试剂需在临用10分钟内配制‌

　　四、常见问题处理

　　标准曲线异常‌：检查稀释过程是否混匀充分，避免气泡残留

　　OD值超范围‌：确认标准品溶解，避免未溶解蛋白被枪头带走

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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