细胞培养板：如何判断细胞是否贴壁成功?

　　使用低吸附细胞培养板时，细胞贴壁成功的判断标准与常规培养板不同，需结合以下方法综合评估：

　　1. 显微镜观察法

　　贴壁状态‌：低吸附培养板设计为抑制细胞贴壁，若细胞仍能贴壁，说明表面处理可能失效或细胞类型特殊。正常情况应为细胞悬浮生长‌。

　　形态特征‌：活细胞应透亮有光泽，死细胞暗淡无光且膜碎裂‌。

　　2. 台盼蓝染色法

　　原理‌：活细胞膜完整，排斥台盼蓝(无色);死细胞膜通透性增加，被染成蓝色‌。

　　操作‌：染色后3分钟内观察，超时可能导致活细胞误染。

　　3. 培养液状态

　　清澈度‌：培养液应清澈，无浑浊、杂质或大量细胞碎片‌。

　　悬浮细胞比例‌：若为贴壁细胞，应有少量悬浮细胞(微量);若为悬浮细胞，应均匀分散‌。

　　4. 细胞活性检测

　　贴壁分子‌：活细胞表面存在功能性黏附分子(如糖蛋白)，死细胞则失活或降解‌。

　　注意事项

　　低吸附培养板特性‌：专为悬浮细胞设计，若细胞贴壁，需检查培养板是否适用或处理是否失效‌。

　　避免误判‌：细胞膜边缘清晰度非金标准，应以膜完整性为准‌。

　　若需进一步确认，可结合台盼蓝染色和显微镜观察，确保细胞活性与培养板适用性匹配。

　　注：供科研使用，以上资料供参考。

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