如何判断低吸附培养板是否失效?

　　显微镜观察法

　　低吸附培养板失效时，细胞会异常贴壁或形成团块。镜下观察：

　　正常状态‌：细胞悬浮生长，呈均匀分散的球状或聚集体‌。

　　失效表现‌：细胞贴壁生长(如呈铺路石状)或出现大量死细胞碎片‌。

　　台盼蓝染色法

　　操作‌：取细胞悬液与台盼蓝染液1:1混合，3分钟内镜检。

　　结果‌：活细胞(膜完整)无色，死细胞(膜破损)染蓝‌。若活细胞率<80%，可能提示培养板表面吸附性异常。

　　培养液状态

　　正常‌：培养液清亮，无浑浊或沉淀‌。

　　异常‌：培养液变黄、浑浊或出现絮状物，可能因细胞代谢异常或污染导致‌。

　　细胞活性检测

　　MTT法‌：活细胞代谢还原紫色结晶，吸光度值高;失效时吸光度显著下降。

　　荧光染色‌：Calcein-AM标记活细胞(绿色)，PI标记死细胞(红色)。若死细胞比例骤增，需怀疑培养板问题。

　　综合判断‌：若显微镜下细胞贴壁、台盼蓝死细胞率>20%、培养液浑浊且MTT吸光度低，则培养板很可能失效。

　　注：供科研使用，以上资料供参考。

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