ELISA实验前准备

　　ELISA实验前准备确实关键，确保你操作时心里有底。实验前准备的核心是‌试剂平衡、样本处理、标准品稀释和板条准备‌，每一步都需严格按规范操作，避免因细节疏漏影响结果。

　　一、试剂平衡与检查

　　试剂盒平衡‌：从冷藏取出的试剂盒需在室温(25℃左右)平衡15-30分钟，避免温度波动影响活性。

　　洗涤液处理‌：若浓缩洗涤液有结晶，可在37℃水浴中加温助溶，稀释后不影响结果。

　　试剂保存‌：底物需避光保存，封板膜仅一次性使用，酶标包被板开封后未用完的板条应装入密封袋中保存。

　　二、样本与标准品准备

　　样本处理‌：新鲜标本应尽早检测，若需长期保存需分装后储存在-20℃或-80℃，避免反复冻融。若样本中待测物质含量过高(OD值大于标准品高孔)，需用样品稀释液稀释n倍后测定，计算时需乘以总稀释倍数(×n×5)。

　　标准品稀释‌：按说明书要求梯度稀释标准品，推荐设置6个浓度梯度(如640pg/ml、320pg/ml、160pg/ml、80pg/ml、40pg/ml、0pg/ml)，每个浓度做复孔以减少误差。

　　三、板条准备

　　从铝箔袋中取出所需板条后，立即将剩余板条与干燥剂一起重新密封保存，防止受潮。

　　将板条稳固地放置于板架上，避免因板条放置不稳导致加样误差。

　　四、其他注意事项

　　试剂复温与平衡‌：

　　所有试剂(包括检测抗体、酶结合物、显色液、标准品等)从冰箱取出，室温(20-25°C)平衡至少20分钟。过冷的试剂会导致吸光度值偏低、标准曲线线性不佳，并可能因冷凝造成孔内液体浓度变化。

　　试剂配制‌：

　　严格按照说明书配制洗涤液、标准品等。洗涤液若为浓缩液，需使用超纯水或蒸馏水准确稀释，确保pH和离子强度正确，避免结晶或污染。

　　注：以上仅供参考，本产品仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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