ELISA样本处理?不同类型ELISA样本处理方法比较

　　不同类型的ELISA样本处理方法存在明显差异，规范的前处理是保障检测结果准确的前提，以下是各类常见样本的处理要点和对比说明，仅参考：

　　一、不同类型样本的处理方法

　　血清样本‌

　　作为ELISA常用的样本，采集后需室温放置1-2小时或4℃过夜让血液自然凝固，之后在2-8℃条件下以1000-3000×g离心10-20分钟，小心收集上层血清，避免吸入沉淀。处理全程要严格避免溶血，防止红细胞释放的过氧化物酶类物质造成非特异性显色，引发假阳性结果。

　　血浆样本‌

　　需使用含对应抗凝剂的采血管收集全血，采集后30分钟内立即在2-8℃条件下以1000×g离心15分钟，分离得到血浆。

　　细胞培养上清‌

　　将收集到的上清液移入离心管，在2-8℃条件下以1000×g离心20分钟，去除悬浮的细胞碎片和杂质，收集澄清上清即可，可直接检测或分装冻存。

　　组织匀浆样本‌

　　先用预冷的PBS缓冲液冲洗新鲜组织去除残留血液，称重后剪为碎块，按1g组织搭配9mL预冷PBS的比例添加缓冲液，在冰浴环境下充分匀浆，之后以5000×g离心5-10分钟，收集上层澄清匀浆液，部分实验需额外测定总蛋白浓度来校正数据。

　　其他特殊样本‌

　　尿液、脑脊液、胸腹水：无菌收集后以1000-3000×g离心15-20分钟，取上清即可检测，避免样本久置析出结晶干扰结果。

　　唾液、粪便：唾液以4000×g离心10分钟取上清;粪便按1:9比例加入PBS振荡混匀后，以5000×g离心5-10分钟取上清，去除固体杂质。Elisa试剂盒

　　二、不同样本处理方法差异对比

　　三、通用要点

　　所有样本处理后都建议按单次使用量分装，短期1-2天可2-8℃冷藏，长期保存需置于-20℃(1个月内)或-80℃(超过1个月)环境，‌严禁反复冻融‌，冻融超过3次会导致蛋白变性降解，大幅降低检测准确性。同时要避免样本中混入(NaN₃)，该物质会抑制HRP酶活性，直接引发假阴性结果。

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