试剂盒的显色液(TMB)和终止液是什么成分?有何注意事项?

　　本生BUNSEN TMB显色液和终止液是ELISA等基于HRP标记实验的配套试剂，二者成分明确，使用时需严格遵循操作规范才能保证实验结果可靠。

　　一、TMB显色液成分

　　底物‌：3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)，化学式C₁₆H₂₀N₂，是辣根过氧化物酶(HRP)的特异性显色底物。

　　辅助组分‌：单组分成品中通常添加(氧化剂)、pH缓冲体系、低浓度异噻唑啉酮类防腐剂，无需额外配制即可直接使用。

　　二、终止液成分

　　常规酸性终止液‌：主流配方为0.25M HCl、0.3M H₂SO₄或2M H₂SO₄，通过强酸环境让HRP瞬间失活，同时将蓝色产物转化为稳定黄色产物。pH缓冲液

　　低腐蚀替代款‌：部分商用产品采用低腐蚀性有机酸配方，规避强腐蚀性危化品的管控限制，适配450nm波长检测。

　　特殊中性终止液‌：0.1% NaF溶液，可保留蓝色产物，适配650nm波长直接读数，无需颜色转换。

　　三、TMB显色液使用注意事项

　　储存条件‌：2-8℃避光密封保存，避免反复冻融，使用前需提前恢复至室温，禁止阳光直射。

　　操作防污染‌：严禁枪头直接插入试剂瓶内取液，倒出的剩余试剂禁止倒回原瓶;避免使用金属、玻璃容器盛装，防止氧化还原剂污染。

　　安全防护‌：试剂对皮肤、黏膜有刺激性，操作需佩戴手套，在通风环境下进行。

　　反应控制‌：过高浓度的HRP会导致显色异常发绿或出现沉淀，需适当稀释酶结合物或缩短孵育时间。

　　四、终止液使用注意事项

　　反应终止时机‌：以最高浓度标准品孔变为深蓝色、阴性对照孔刚显浅蓝色为最佳终止点，避免显色不足或反应过度。

　　加样操作规范‌：加样顺序需与之前加显色液的顺序保持一致，每孔加完后立即轻拍酶标板混匀，避免局部酸浓度不均。

　　读数时效控制‌：终止后15-30分钟内完成读数，超时会导致OD值下降、本底升高，信号稳定性变差。

　　试剂状态核查‌：使用前确认终止液为无色澄清状态，若出现变黄、沉淀则说明已污染失效，必须重新配制。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　本生BUNSEN科研耗材适应客户：医院检验科PCR实验室，中心实验室，肝病中心;第三方检测机构，科研院所，大专院校，制药厂，试剂生产厂家，疾控中心，检验检疫。