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小鼠α淀粉酶(α-AMS)ELISA试剂盒实验使用说明书
一、产品概述
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中α-淀粉酶(α-AMS)的含量,仅供研究使用。
二、实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠α-淀粉酶(α-AMS)水平。具体原理为:用纯化的小鼠α-淀粉酶(α-AMS)抗体包被微孔板,制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入α-淀粉酶(α-AMS),再与HRP标记的α-淀粉酶(α-AMS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后加底物TMB显色,TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的α-淀粉酶(α-AMS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠α-淀粉酶(α-AMS)浓度。
三、试剂盒组成
试剂盒通常包含以下组件(以48孔或96孔配置为例):
说明书:1份
封板膜:相应孔数对应片数
密封袋:1个
酶标包被板:相应孔数
其他必要试剂(如标准品、酶标试剂、显色剂等):具体数量及规格根据试剂盒说明书确定
四、样本处理与保存
血清:使用不含热原和内毒素的试管收集血液,离心分离血清和红细胞。
血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,离心取上清。
其他样本(如细胞上清液、组织匀浆等):根据具体样本类型进行适当处理,确保去除颗粒和聚合物。
样本保存:如不及时检测,请按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。
五、操作步骤
准备试剂与样本:确保所有试剂和样本均已恢复至室温,并按说明书要求稀释或处理。
加样:按照说明书的步骤,在酶标包被板中加入标准品、样本及必要试剂。
孵育与洗涤:按说明书要求的时间和温度进行孵育,之后洗涤以去除未结合的试剂。
显色与终止:加入显色剂后,按说明书要求的时间和条件进行显色反应。之后加入终止液终止反应。
测定与计算:使用酶标仪在波长下测定吸光度,并根据标准曲线计算样品中小鼠α-淀粉酶(α-AMS)的浓度。
六、注意事项
请严格按照说明书操作,避免交叉污染和试剂浪费。
试剂盒中的试剂为一次性使用,不可重复使用。
实验过程中请佩戴适当的个人防护装备,如手套、口罩等。
如遇问题或异常结果,请及时联系试剂盒供应商或技术支持。
七、引用
本说明书内容基于当前可获得的公开信息整理而成,具体实验操作请参照实际购买的试剂盒说明书执行。