小麦醇溶蛋白ELISA试剂盒是用于检测植物组织、细胞上清及相关液体样本中小麦醇溶蛋白含量的重要工具。使用前，需将试剂盒从冷藏环境中取出，室温平衡15-30分钟。实验时，采用双抗体夹心法，将纯化的小麦醇溶蛋白抗体包被微孔板，加入样本及HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加底物TMB显色，颜色深浅与样品中小麦醇溶蛋白含量正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样品中小麦醇溶蛋白浓度。注意，实验过程需避免交叉污染，严格按照说明书操作，且不同批号组分不得混用。试剂盒保存于2-8℃，有效期6个月。

　　BS-5040  小麦醇溶蛋白(Gliadin)ELISA试剂盒  天津本生

　　以下是小麦醇溶蛋白(Gliadin)ELISA试剂盒的实验使用说明书：

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法：用纯化的Gliadin抗体包被微孔板，依次加入样本/标准品、HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。TMB显色后在450nm波长下测定OD值，颜色深浅与Gliadin浓度呈正相关‌。

　　二、试剂盒组成

　　组分 96孔配置 48孔配置

　　酶标板 12孔×8条 12孔×4条

　　标准品(16μg/mL) 0.5mL×1瓶 0.5mL×1瓶

　　酶标试剂 6mL 3mL

　　显色剂A/B 各6mL 各3mL

　　终止液 6mL 3mL

　　30×洗涤液 20mL 15mL ‌

　　三、样本处理要求

　　血清/血浆‌：采集后1000×g离心10-30分钟，避免溶血‌

　　细胞上清‌：1000×g离心10分钟去除颗粒‌

　　组织匀浆‌：用生理盐水匀浆后离心取上清‌

　　保存‌：-20℃短期保存，-70℃长期保存，避免反复冻融‌

　　四、操作步骤

　　标准品稀释‌：用标准品稀释液进行梯度稀释(建议浓度：0、0.2、1、4、9μg/mL)‌

　　加样‌：

　　空白孔：不加样

　　标准孔：50μL标准品

　　样本孔：40μL稀释液+10μL样本(5倍稀释)‌

　　温育‌：37℃孵育30分钟‌

　　洗涤‌：用稀释后的洗涤液洗板5次，每次静置30秒‌

　　显色‌：每孔加显色剂A/B各50μL，37℃避光反应10分钟‌

　　终止‌：每孔加50μL终止液‌

　　检测‌：450nm波长读取OD值，绘制标准曲线计算浓度‌

　　五、注意事项

　　安全防护‌：避免接触终止液/显色剂，操作时穿戴防护装备‌

　　试剂保存‌：

　　未开封试剂盒2-8℃保存

　　开封后酶标板需密封防潮‌

　　质量控制‌：

　　标准品复孔CV应<15%

　　样本OD值应在标准曲线范围内‌

　　六、技术参数

　　检测范围‌：0.2-9μg/mL(96T)‌

　　灵敏度‌：<0.1μg/mL‌

　　有效期‌：6个月(2-8℃保存)‌

　　(注：不同品牌试剂盒可能存在细微差异，请以实际产品说明书为准)

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