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以下是植物转醛醇酶(TAL)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南:
BS-5006 植物转醛醇酶(TAL)ELISA试剂盒
一、实验原理
采用双抗体夹心法或双抗原夹心法,通过包被抗体/抗原与样本中的目标物结合,再与酶标抗体形成复合物,最终通过TMB显色反应测定吸光度(OD值)。
二、试剂盒组成
主要组分:
预包被微孔板(12孔×8条)
标准品(0.3mL×6管)
HRP标记检测抗体(5mL)
TMB底物(A/B液各6mL)
终止液(3mL)
20×洗涤缓冲液(15mL)
保存条件:
未开封试剂盒需2-8℃保存,有效期6个月。
三、样本处理
血清/血浆:
采集后静置10-20分钟,离心(2000-3000转/分)20分钟取上清。
组织样本:
匀浆后加入PBS(pH7.4),离心取上清。
细胞培养上清:
直接离心去除沉淀。
四、操作步骤
加样:
每孔依次加入标准品或样本50μL,再加入HRP标记抗体50μL。
温育:
37℃避光孵育30-60分钟,洗涤5次。
显色:
加入TMB底物100μL,避光反应15-30分钟。
终止与检测:
加入终止液50μL,立即于450nm波长读取OD值。
五、注意事项
避免微孔板接触污染物,未用完板条需密封保存。
显色反应需严格控制时间,防止过度显色。
批内变异系数(CV%)应<10%,回收率需在85%-115%范围内。
六、技术支持
若需实验代测或技术指导,部分厂商提供免费服务。
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