以下是关于大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(MFO)ELISA试剂盒实验使用说明书的综合信息整理：

　　BS-3491  大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(MFO)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒基本参数

　　检测原理‌：双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，在450nm波长下测定吸光度值‌

　　规格‌：48T/96T(可拆卸孔板)‌

　　保存条件‌：2-8℃冷藏，有效期6个月‌

　　样本类型‌：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等‌

　　二、实验前准备

　　器材准备‌：

　　96孔酶标仪、自动洗板机‌

　　移液器及一次性枪头(建议使用排枪)‌

　　Eppendorf管及干净塑料容器‌

　　试剂处理‌：

　　使用前将所有试剂平衡至室温‌

　　标准品需现配现用，稀释后不可保存‌

　　底物B需避光保存，避免金属接触‌

　　三、实验步骤

　　加样顺序‌：

　　按说明书要求依次加入标准品/样本→生物素标记抗体→HRP标记亲和素‌

　　每步骤需严格控制温育时间和温度‌

　　洗涤操作‌：

　　使用20×洗涤液配制工作液，洗板后需充分拍干‌

　　避免吸水纸直接接触反应孔‌

　　显色与终止‌：

　　底物TMB显色10-15分钟，显色后立即终止‌

　　终止液为酸性溶液，需避免皮肤接触‌

　　四、注意事项

　　安全防护‌：

　　操作时需穿戴实验服及手套，避免接触终止液/底物‌

　　禁止用嘴吸取任何试剂‌

　　质量控制‌：

　　板内变异系数<10%，板间变异系数<15%‌

　　回收率需达到85%-115%‌

　　五、数据计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线‌

　　样本浓度需高于空白对照OD均值+2SD才具统计学意义‌

　　(注：完整说明书应包含具体浓度梯度、温育时间等参数，建议以实际试剂盒配套说明书为准‌)

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