大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是关于大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南：

　　BS-3458  大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法测定标本中T4水平。通过纯化的大鼠T4抗体包被微孔板形成固相抗体，依次加入样本、HRP标记的T4抗体形成复合物，经TMB显色后测定450nm吸光度(OD值)，其颜色深浅与T4浓度呈正相关。

　　二、试剂盒组成

　　组分 48孔配置 96孔配置 保存条件

　　酶标包被板 1×48孔 1×96孔 2-8℃

　　标准品(270μg/L) 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃

　　酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　显色剂A/B液 各3ml×1瓶 各6ml×1瓶 2-8℃

　　终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃

　　三、样本处理要求

　　血清‌：室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟取上清，避免反复冻融

　　血浆‌：EDTA/肝素抗凝采集，30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟

　　组织匀浆‌：PBS冲洗后称重剪碎，按重量体积比1:9加入生理盐水匀浆，2000-3000转/分离心20分钟取上清

　　四、操作步骤

　　加样‌：标准品/样本加入对应孔，建议做复孔

　　孵育‌：37℃温育30分钟

　　洗涤‌：甩干孔内液体，每孔加满洗涤液静置30秒后甩干，重复5次

　　加酶标试剂‌：每孔50μl，37℃避光孵育30分钟

　　显色‌：依次加入显色剂A/B各50μl，37℃避光反应15分钟

　　终止‌：每孔加终止液50μl

　　检测‌：450nm波长测定OD值(建议5分钟内完成)

　　五、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线

　　样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数

　　检测范围：0.703-45ng/ml，灵敏度0.422ng/ml

　　六、注意事项

　　试剂使用前需平衡至室温(20-25℃)

　　不同批号试剂不得混用

　　浓缩洗涤液出现结晶时需37℃溶解后使用

　　有效期6个月，2-8℃保存，避免反复冻融

　　七、技术支持

　　部分厂商提供免费代测服务及无效退换承诺，具体可咨询供应商。

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