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大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒实验使用说明书
以下是关于大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理:
BS-3466 大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒
一、试剂盒组成
核心组分
预包被抗原/抗体的微孔板(48孔或96孔配置)
酶标记抗体(3ml/48孔或6ml/96孔)
标准品(通常为2700ng/L浓度)及稀释液
显色剂(如TMB)、终止液、洗涤缓冲液
辅助材料
阴性/阳性对照品(用于质控)
封板膜、密封袋、说明书
二、实验步骤
样本准备
血清/血浆:采集后需离心(1000×g,10分钟)去除颗粒,避免溶血或脂血干扰。
组织匀浆:加入生理盐水匀浆后离心取上清。
保存:短期存于2-8℃,长期需分装后-70℃保存,避免反复冻融。
操作流程
包被(若需自行包被):用缓冲液稀释抗原/抗体,加入孔板后4℃过夜。
加样:加入标准品或待测样本,37℃孵育反应。
洗涤:弃液后使用洗涤缓冲液清洗3-5次。
显色:加入酶标抗体及显色剂,避光反应后终止。
结果计算
以标准品浓度(X轴)和OD值(Y轴)绘制标准曲线(半对数坐标),通过回归方程计算样本浓度。
若样本稀释,需乘以稀释倍数。
三、注意事项
质量控制:每批次实验需包含阴/阳性对照,确保试剂有效性。
仪器要求:需配备酶标仪、洗板机及37℃恒温箱。
特异性:该试剂盒仅检测大鼠AMA,与其他蛋白无交叉反应。
用途限制:仅用于科研,不可用于临床诊断。
四、保存与有效期
未开封试剂盒保存于2-8℃,有效期通常为6个月。
开封后组分需按说明书要求单独保存。
如需更详细步骤或问题解答,建议参考试剂盒附带的完整说明书。
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