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天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
以下是小鼠转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒的实验使用说明书(综合多品牌参数及操作要点):
BS-2006 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒
一、试剂盒组成
组分 规格(96T/48T) 保存条件
预包被微孔板 8×12 strips / 8×6 4℃干燥
TGF-β2标准品 冻干粉(10,000pg/mL) 4℃(复溶后)
检测抗体(生物素标记) 120μL/70μL 4℃避光
HRP标记链霉亲和素 120μL/70μL 4℃避光
TMB显色液 10mL/6mL 4℃避光
终止液(2M H₂SO₄) 10mL/6mL 室温
二、实验前准备
样本处理
血清/血浆:采集后1000×g离心25分钟,避免溶血或脂血。
细胞上清:离心去除颗粒,分装保存于-80℃(避免反复冻融)。
组织匀浆:按重量体积比1:9加入PBS匀浆,离心取上清。
试剂平衡
所有试剂及样本需室温平衡30分钟(18-25℃),避免37℃直接溶解。
标准品稀释
复溶标准品后,用稀释液梯度稀释至5,000pg/mL→78pg/mL(7个浓度点),0pg/mL为空白对照。
三、实验步骤(双抗体夹心法)
加样
每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育90分钟。
洗涤
弃液后,用洗涤液(PBST)洗板5次,拍干。
加检测抗体
每孔加100μL生物素化抗体(1:100稀释),37℃孵育60分钟。
加酶结合物
加入HRP标记链霉亲和素(1:100稀释),37℃避光孵育30分钟。
显色
加TMB显色液100μL/孔,避光反应15-20分钟(显蓝色)。
终止与读数
加50μL终止液(黄色),450nm波长测OD值(需在10分钟内完成)。
四、数据分析
标准曲线绘制
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,拟合四参数逻辑曲线(R²>0.99)。
样本浓度计算
根据样本OD值从曲线反推浓度,超出范围需稀释后重测。
五、注意事项
精密度控制
批内CV<10%,批间CV<12%。
干扰因素
避免细菌污染(内源性HRP导致假阳性)、反复冻融或剧烈震荡。
保存条件
未使用的微孔板条需密封防潮,2-8℃保存。
六、技术参数
检测范围:15.6-1000pg/mL(灵敏度9.375pg/mL)。
适用样本:血清、血浆、细胞上清、组织匀浆。
天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。