以下是关于人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理：

　　BS-0223 人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法(ABC-ELISA法)检测样本中ICAD浓度。通过标准品与样本OD值的比例关系计算浓度。

　　二、试剂盒组成

　　标准品‌：400ng/ml或2700ng/L(需用稀释液复溶)

　　酶标包被板‌：96孔或48孔配置

　　显色剂‌：底物A/B液

　　洗涤液‌：20×浓缩液需1:20稀释

　　终止液‌：用于终止反应

　　三、操作步骤

　　样本准备‌

　　血清/血浆：离心后取上清，避免反复冻融。

　　组织匀浆：需充分混匀。

　　标准品复溶‌

　　冻干标准品加0.5ml稀释液，静置10分钟溶解。

　　加样与温育‌

　　标准品孔加50μL不同浓度标准品，样本孔加10μL样本+40μL稀释液。

　　每孔加入HRP标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

　　洗涤‌

　　用洗涤液洗板5次，拍干。

　　显色与终止‌

　　加底物A/B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

　　加终止液50μL，15分钟内测450nm OD值。

　　四、注意事项

　　保存条件‌：试剂盒2-8℃保存，使用前室温平衡20分钟。

　　质量控制‌：建议标准品和样本做双份检测。

　　干扰因素‌：避免细菌污染或反复冻融。

　　五、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过回归方程计算样本浓度。

　　如需具体试剂盒的完整说明书，可参考厂商提供的详细文档，以上资料仅供参考。

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