猪白介素12(IL-12)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是天津本生猪白介素12(IL-12)ELISA试剂盒的实验使用说明摘要：

　　BS-4657   猪白介素12(IL-12)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法：包被抗猪IL-12抗体的微孔板捕获样本中的IL-12，依次加入生物素化检测抗体和酶标试剂，通过TMB显色反应测定OD值，浓度与吸光度成正比。

　　二、试剂盒组成

　　标准品‌：通常为4ng/瓶(2瓶)或梯度浓度(如0-2000 pg/mL)

　　酶标板‌：预包被抗体的96孔板

　　检测抗体‌：HRP标记的抗体工作液

　　洗涤液‌：20×浓缩液需稀释使用

　　显色液(TMB)‌及终止液

　　三、操作步骤

　　样本准备‌：血清/血浆需离心(3000rpm, 10分钟)，组织匀浆需研磨离心。

　　标准品稀释‌：按说明书梯度稀释(如原倍标准品稀释至125-2000 pg/mL)。

　　加样‌：

　　标准孔：50μL标准品

　　样本孔：40μL稀释液 + 10μL样本(最终稀释5倍)。

　　温育‌：37℃孵育30分钟，洗涤5次。

　　显色‌：加入TMB避光显色15分钟，终止后15分钟内测450nm OD值。

　　四、注意事项

　　试剂盒需2-8℃保存，使用前平衡至室温。

　　洗涤需，避免孔间交叉污染。

　　计算结果时需乘以稀释倍数(如5倍)。

　　五、检测范围与性能

　　灵敏度‌：通常<1.0 IU/mL。

　　检测范围‌：10-240ng/L或6.25-2000 pg/mL(不同品牌有差异)。

　　完整操作请以具体试剂盒说明书为准，以上资料仅供参考。

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