以下是猪甘油三酯(TG)ELISA试剂盒的实验使用说明书综合要点：

　　BS-4705  猪甘油三酯(TG)ELISA试剂盒

　　一、检测原理

　　采用双抗体夹心法，通过酶标仪测定450nm波长下OD值，颜色深浅与TG浓度呈正相关。

　　二、试剂盒组成

　　包被抗体微孔板‌：预包被猪TG特异性抗体

　　酶标抗体‌：HRP标记的TG抗体

　　标准品‌：浓度梯度校准液(需按说明书稀释)

　　TMB显色液/终止液‌：含底物和酸性终止剂

　　洗涤缓冲液‌：20×浓缩液需蒸馏水稀释

　　三、样本处理

　　血清/血浆‌：3000rpm离心10分钟，避免溶血

　　组织匀浆‌：按1:5~10比例(重量/体积)加入PBS匀浆，8000g离心取上清

　　细胞上清‌：直接检测或-20℃保存(避免反复冻融)

　　四、操作步骤

　　平衡试剂‌：冷藏试剂需室温平衡15-30分钟

　　加样‌：

　　标准品孔：梯度加入50μL不同浓度标准液

　　样本孔：加入50μL待测样本

　　孵育‌：37℃反应30-60分钟，洗涤5次

　　显色‌：每孔加TMB底物100μL，避光反应15分钟

　　终止与读数‌：加终止液50μL，15分钟内测450nm OD值

　　五、注意事项

　　质量控制‌：每板需设空白孔、标准曲线复孔

　　干扰因素‌：样本中TG含量过高需稀释(计算时乘以稀释倍数)

　　储存条件‌：未开封试剂2-8℃保存，开封板条需密封防潮

　　安全提示‌：废弃物按生物危害物处理

　　六、技术参数

　　检测范围‌：通常为0.312-20ng/mL(不同品牌可能有差异)

　　灵敏度‌：检出限约0.1ng/mL

　　完整操作请以具体试剂盒说明书为准，部分品牌提供96孔/48孔两种规格。

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