猪肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-8208 猪肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA试剂盒

　　以下是天津本生猪肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理：

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法(或一步夹心法)检测样本中的HB-EGF浓度。通过包被抗体捕获目标蛋白，再结合酶标抗体形成复合物，经TMB显色后测定OD值，浓度与吸光度呈正相关。

　　二、试剂盒组成

　　主要成分‌

　　预包被微孔板

　　标准品(通常含冻干粉，需用稀释液重构)

　　酶标抗体、显色剂(A/B液)、终止液

　　浓缩洗涤液(需稀释使用)

　　保存条件‌

　　未开封试剂需2-8℃保存，标准品及样本稀释后建议分装冻存(-20℃以下)，避免反复冻融。

　　三、样本处理

　　血清/血浆‌：离心去除杂质(1000×g，15-20分钟)，溶血样本不可用。

　　组织匀浆‌：需用PBS冲洗后匀浆，离心取上清(5000×g，5-10分钟)。

　　细胞培养上清‌：直接离心(1000×g，20分钟)后检测。

　　四、操作步骤

　　标准品稀释‌：按说明书梯度稀释(通常为2倍系列稀释)。

　　加样与温育‌：

　　每孔加入标准品或样本100μL，37℃孵育1-2小时。

　　洗涤‌：使用稀释后的洗涤液洗板4-6次。

　　显色与终止‌：

　　加入TMB显色液，避光反应10-15分钟，后加终止液。

　　检测‌：450nm波长读取OD值，绘制标准曲线计算浓度。

　　五、注意事项

　　避免试剂交叉污染，不同批号组件勿混用。

　　显色时间需严格控制，强阳性样本可能需进一步稀释。

　　实验前需平衡所有试剂至室温(约30分钟)。

　　如需具体参数(如标准品初始浓度、灵敏度等)，请参考试剂盒配套说明书或咨询技术老师。

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