以下是鸡β干扰素(IFN-β)ELISA试剂盒的实验说明书核心内容整理：

　　BS-4389 鸡β干扰素(IFN-β)ELISA试剂盒

　　一、检测原理

　　采用双抗体夹心法，通过预包被的鸡IFN-β抗体捕获样本中的目标蛋白，再与HRP标记的检测抗体结合形成复合物，经TMB显色系统反应后，450nm波长下测定OD值，颜色深度与IFN-β浓度成正比。

　　二、试剂盒组成

　　预包被微孔板‌：96孔或48孔规格(抗鸡IFN-β抗体包被)

　　标准品‌：6浓度梯度(常见范围：25-800pg/mL或15.625-1000pg/mL)

　　酶标抗体‌：HRP标记的检测抗体

　　显色系统‌：TMB底物A/B液

　　终止液‌：2M硫酸溶液

　　浓缩洗涤液‌：20×或30×需稀释使用

　　三、样本处理要求

　　血清/血浆‌：3000rpm离心10-30分钟，避免溶血

　　细胞培养上清‌：直接离心去除颗粒物

　　组织匀浆‌：按重量比加入PBS匀浆后离心取上清

　　保存条件‌：-20℃分装，避免反复冻融

　　四、操作步骤

　　平衡试剂‌：所有组分室温平衡20-30分钟

　　加样‌：标准品/样本按50-100μL/孔加入

　　孵育‌：37℃反应30-60分钟，洗涤3-5次

　　显色‌：加入TMB避光反应10-15分钟

　　终止与检测‌：加终止液后立即测定450nm OD值

　　五、关键参数

　　检测范围‌：2-48ng/L或15.625-1000pg/mL(不同品牌有差异)

　　灵敏度‌：检测限5.7pg/mL

　　精密度‌：板内/板间变异系数<10%

　　有效期‌：6-12个月(2-8℃保存)

　　六、注意事项

　　不同批次试剂不可混用

　　显色时间需严格控制，强光会干扰结果

　　加样需保持速度一致，避免孔间时间差过大

　　酶标板开封后需密封防潮保存

　　完整操作请以试剂盒内附说明书为准，部分品牌提供免费代测服务。

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