以下是鸡极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA试剂盒的实验使用说明书综合整理：

　　BS-7303 鸡极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA试剂盒

　　一、实验原理‌

　　采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。通过预包被抗体的微孔板捕获样本中的VLDL，加入酶标记检测抗体后形成复合物，经底物显色(TMB显蓝色，酸化后转黄色)，颜色深浅与VLDL浓度成正比。

　　二、试剂盒组成‌

　　预包被板条‌：96孔或48孔配置(含空白对照孔)

　　标准品‌：24ng/ml(需按说明书稀释)

　　酶标抗体‌：HRP标记的检测抗体

　　底物(A/B液)‌：TMB显色液

　　终止液‌：酸性溶液

　　洗涤液‌：需稀释的浓缩液

　　三、操作步骤‌

　　样本准备‌

　　血清/血浆样本需离心去除颗粒物，建议1:1稀释后使用。

　　标准品与样本加样‌

　　标准品孔：加入不同浓度标准品50μL。

　　样本孔：加入待测样本50μL，空白孔不加。

　　孵育与洗涤‌

　　加入酶标抗体100μL，37℃孵育60分钟。

　　洗涤5次(每孔加洗涤液350μL，静置1分钟后拍干)。

　　显色与终止‌

　　每孔加底物A/B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

　　加入终止液50μL，5秒内摇匀。

　　检测‌

　　酶标仪450nm波长测定OD值。

　　四、注意事项‌

　　保存条件‌：试剂盒2-8℃保存，频繁使用时避免反复冻融。

　　交叉污染‌：使用一次性吸头，避免金属部分接触终止液/底物。

　　洗涤要求‌：充分拍干微孔板，避免残留液体影响结果。

　　数据有效性‌：标准品线性回归R值需≥0.9900，批内变异系数<15%。

　　五、技术参数‌

　　检测范围‌：10–320 μmol/L(不同品牌可能差异)。

　　灵敏度‌：检测浓度<1.0 ng/L。

　　有效期‌：6个月(2-8℃保存)。

　　注：以上仅供参考，如需具体品牌试剂盒的差异说明，可进一步补充信息。

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