大鼠白介素3(IL-3)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-2969  大鼠白介素3(IL-3)ELISA试剂盒

　　以下是天津本生关于大鼠白介素3(IL-3)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南：

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心ELISA法，通过预包被抗体捕获样本中的IL-3，再与生物素标记的检测抗体及HRP标记的亲和素形成复合物，TMB显色后测定OD值，浓度与吸光度成正比。

　　二、试剂盒组成

　　预包被96孔板

　　冻干标准品(需用1ml蒸馏水复溶)

　　生物素标记抗体(100×浓缩)

　　HRP标记亲和素(100×浓缩)

　　洗涤缓冲液(25×浓缩)

　　TMB显色液及终止液

　　三、样本处理

　　血清/血浆‌：采集后1000×g离心10分钟，避免溶血或脂血

　　组织匀浆‌：用生理盐水匀浆后离心取上清

　　保存‌：短期存于2-8℃(48小时内)，长期需分装冻存于-70℃，避免反复冻融

　　四、实验步骤

　　标准品稀释‌：按说明书梯度稀释(示例：4000→2000→1000 pg/mL等比稀释)

　　加样‌：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育120分钟

　　洗涤‌：用1×洗涤液洗板4-6次，拍干

　　加检测抗体‌：加入生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟

　　加酶结合物‌：加入HRP标记亲和素，37℃孵育30分钟

　　显色‌：加入TMB避光显色15分钟，终止后450nm读数

　　五、注意事项

　　不同批次试剂不可混用，使用前所有组分需平衡至室温

　　显色时间需严格控制，终止后10分钟内完成读数

　　避免底物接触金属器械，操作时需佩戴防护装备

　　若样本浓度超出范围，需用稀释液适当稀释后重测

　　六、数据计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过拟合方程计算样本浓度。

　　注：以上资料仅供参考，如需更详细参数(如检测范围、灵敏度等)，建议查阅试剂盒配套说明书或联系供应商获取。

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