大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是关于大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理：

　　BS-2953  大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒

　　一、检测原理

　　采用双抗体夹心ELISA法：包被抗大鼠OxLDL抗体的微孔板中依次加入样本和标准品，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，TMB显色后颜色深浅与OxLDL浓度成正比。

　　二、试剂盒组成

　　主要组分‌

　　预包被酶标板(96孔或48孔)

　　标准品(冻干粉或液体，含不同浓度梯度)

　　酶标抗体工作液(HRP标记)

　　显色液(TMB A/B液)

　　终止液(硫酸溶液)

　　浓缩洗涤液(20×或30×)

　　保存条件‌

　　未开封试剂盒需2-8℃保存，部分组分(如标准品)需-20℃冻存;开封后酶标板应密封防潮。

　　三、样本处理

　　样本类型‌：血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、组织匀浆或细胞上清液。

　　处理方法‌：

　　血清/血浆：3000转/分离心10-20分钟去除颗粒物。

　　组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清。

　　稀释要求：部分试剂盒需用配套稀释液按1:1或1:2预稀释。

　　四、实验步骤

　　标准品配制‌：冻干标准品需用稀释液复溶，梯度稀释为5-7个浓度(如5ng/ml至75ng/ml)。

　　加样与孵育‌：

　　每孔加入50μl标准品或样本，37℃孵育1小时。

　　洗涤3次后加入酶标抗体，再次孵育30分钟。

　　显色与终止‌：

　　加入TMB显色液避光反应10分钟，后加终止液变黄色。

　　检测‌：450nm波长测定OD值，空白孔调零。

　　五、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，样本浓度通过曲线方程计算后乘以稀释倍数。

　　注意：高浓度样本可能需二次稀释以保证线性范围。

　　六、注意事项

　　避免反复冻融样本，解冻后需混匀。

　　洗涤需，防止非特异性结合。

　　显色时间需严格控制，避免过度反应。

　　不同批次试剂盒组分不可混用。

　　七、局限性

　　浓度样本(超过标准曲线范围)需稀释后重测。

　　注：以上资料仅供参考，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

　　如需具体操作细节，建议参考对应试剂盒说明书(如48孔/96孔配置可能步骤略有差异)。

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