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以下是猪α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA试剂盒的实验使用说明摘要:
BS-4661 猪α半乳糖基抗原(α-gal)ELISA试剂盒 天津本生
一、实验原理
采用双抗体夹心法,通过包被抗体捕获样本中的α-Gal抗原,再与酶标抗体形成复合物,经TMB显色后测定OD值计算浓度。
二、试剂盒组成
预包被微孔板(48孔/96孔)
标准品(冻干粉,需用稀释液重构)
酶标试剂、显色剂(A/B液)、终止液
浓缩洗涤液(20-30倍)
三、样本处理要求
样本类型 处理方法
血清 室温凝固后离心取上清(2000-3000转/分,20分钟)
血浆 EDTA/肝素抗凝,离心后取上清
组织匀浆 按1:9比例与PBS冰上研磨
保存条件 -20℃分装,避免反复冻融
四、操作步骤
平衡试剂:所有组分室温平衡15-30分钟
标准品稀释:按说明书梯度稀释(如78-5000pg/mL)
加样:
标准品/样本各50μL加入对应孔
加入酶标试剂50μL,37℃孵育1-2小时
洗涤:用1×洗涤液洗板3-5次,拍干
显色:加TMB避光反应10-20分钟,终止后15分钟内检测
五、注意事项
避免孔板干燥或污染
显色时间需严格控制
不同批号试剂不可混用
450nm波长读取OD值,建议做复孔
六、性能参数
检测范围:125-4000pg/mL
批内/批间CV:<10%
回收率:85%-115%
注:以上资料仅供参考,完整操作请以试剂盒内附说明书为准。
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