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以下是猪黄体生成素(LH)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理:
BS-4691 猪黄体生成素(LH)ELISA试剂盒
一、试剂盒组成
预包被板条:96孔或48孔微孔板(可拆卸)
标准品:通常包含6个浓度梯度(如0-160 ng/mL)
检测溶液:包括HRP标记抗体、TMB底物、终止液等
洗涤液:30倍浓缩液,需蒸馏水稀释
二、样本处理
血清/血浆:采集后室温静置1-2小时,3000rpm离心15分钟,避免溶血或反复冻融
组织匀浆:用预冷PBS(含蛋白酶抑制剂)研磨,5000×g离心取上清
保存条件:短期存于2-8℃,长期需-20℃以下保存
三、实验步骤
平衡试剂:所有试剂室温平衡30分钟后再使用
加样:
标准品孔:50μL梯度浓度标准品
样本孔:10μL样本+40μL稀释液
孵育:37℃避光温育60分钟,需加盖封板膜防止蒸发
洗涤:手工洗板需重复5次,拍干残留液体
显色:每孔加TMB底物50μL,37℃避光显色15分钟
终止与检测:加终止液后15分钟内测450nm OD值
四、注意事项
操作规范:避免底物接触金属器具,显色后及时终止
质量控制:建议标准品和样本做复孔,减少误差
失效提示:若标准曲线R²<0.99需重试
五、结果计算
通过标准曲线拟合方程计算样本浓度,线性范围为9.375-600 mIU/mL。
如需更详细说明,可参考具体试剂盒附带的说明书。
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