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以下是兔子白介素1可溶性受体I(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒的综合使用说明:
BS-4068 兔子白介素1可溶性受体I(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒 天津本生
一、实验原理
采用双抗体夹心法:包被抗IL-1sRⅠ抗体的微孔板捕获样本中的目标蛋白,与HRP标记的检测抗体结合形成复合物,TMB显色后通过OD值定量分析。
二、试剂盒组成
标准品:冻干粉(需稀释液复溶)
酶标试剂:HRP标记抗体(3ml/6ml)
洗涤缓冲液:50×浓缩液(需蒸馏水稀释)
显色系统:TMB底物与终止液各12ml
辅助材料:封板膜、密封袋、说明书
三、样本处理要求
样本类型 处理方式 保存条件
血清/血浆 2000-3000rpm离心10-30分钟 短期2-8℃,长期-20℃分装
组织匀浆 PBS匀浆后离心取上清 -20℃避免反复冻融
细胞上清 离心去除碎片 分装冻存
注意:避免使用含NaN3的样本(抑制HRP活性)。
四、操作步骤
标准品稀释:梯度稀释至7个浓度,第8孔为空白对照
加样孵育:加50-100μl样本,37℃孵育1-2小时
洗涤:使用稀释洗涤液洗板4-6次,拍干
显色:加TMB避光反应15-30分钟,终止后15分钟内测OD450nm
数据计算:以标准曲线回归方程计算浓度
五、注意事项
不同批号试剂不可混用,底物需避光保存
显色时间需严格控制,OD值超范围需稀释复测
实验需设双复孔取平均值以减少误差
酶标板开封后未用完需密封加干燥剂保存
六、技术服务支持
部分厂商提供免费代测服务,包括实验设计、数据解析等。如需具体品牌完整说明书,建议联系供应商获取版本。
注:以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师或品牌供应商。
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