兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒的实验使用说明书，综合相关产品技术参数和操作规范整理：

　　BS-4221 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒 天津本生

　　一、试剂盒组成

　　预包被板‌：96孔或48孔(抗兔FⅡ抗体包被)

　　标准品‌：6-7管冻干粉(浓度梯度：0.5-16 μmol/L)

　　检测抗体‌：HRP标记的抗兔FⅡ多克隆抗体

　　样本稀释液‌、20×洗涤缓冲液

　　显色底物‌(TMB A/B)、终止液(2M硫酸)

　　封板膜‌、说明书等耗材

　　二、样本处理要求

　　血清/血浆‌：

　　全血采集后室温静置1-2小时，4℃离心(3000 rpm，20分钟)取上清

　　避免使用溶血或高脂血样本，短期保存于-20℃，长期需-80℃冻存

　　组织匀浆‌：

　　按1:9(重量:体积)加入PBS匀浆，离心后取上清检测

　　三、实验步骤(双抗体夹心法)

　　标准品复溶‌：每管加200 μL稀释液溶解，梯度稀释为1/2~1/64浓度系列

　　加样孵育‌：

　　标准孔：直接加50 μL标准品

　　样本孔：先加10 μL样本，再加40 μL稀释液(5倍稀释)

　　37℃孵育60分钟，洗板5次(手工冲洗或洗板机)

　　显色与检测‌：

　　每孔加TMB底物50 μL，避光显色15分钟

　　加终止液后15分钟内测OD450值

　　四、注意事项

　　试剂保存‌：未开封试剂盒2-8℃保存，复溶后标准品需分装-20℃冻存

　　质量控制‌：

　　板内变异系数<10%，板间变异系数<15%

　　建议标准曲线R²≥0.990

　　干扰规避‌：避免使用NaN3防腐剂(抑制HRP活性)

　　五、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。若样本OD值超出标准曲线范围，需适当稀释后重测

　　如需具体产品的完整说明书或代测服务，可联系供应商获取(部分厂商提供免费代测和技术支持)。

　　注：以上资料仅供参考，具体请咨询技术老师或品牌供应商。

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