兔子肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是兔子肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒的实验使用说明书综合整理：

　　BS-4199 兔子肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒

　　一、实验原理‌

　　采用双抗体夹心法检测样本中iFABP含量：

　　包被抗iFABP抗体的微孔板捕获样本中的iFABP;

　　加入生物素化抗体与HRP标记的亲和素形成复合物;

　　TMB底物显色(蓝色→黄色)，颜色深度与iFABP浓度正相关。

　　二、试剂盒组成‌

　　48孔/96孔配置‌：

　　预包被微孔板

　　标准品(225 nmol/L)及稀释液

　　酶标试剂(HRP标记)

　　洗涤缓冲液、TMB显色液、终止液

　　封板膜、说明书

　　三、实验步骤‌

　　样本准备‌：

　　血清/血浆：离心去除颗粒(1000×g，10分钟);

　　细胞上清液或组织匀浆：离心后取上清。

　　操作流程‌：

　　将试剂平衡至室温(30分钟);

　　加入标准品或样本(100μL/孔)，4℃过夜孵育;

　　洗涤7次后加入酶标抗体(100μL/孔)，4℃孵育30分钟;

　　洗涤9次，加入TMB显色(避光30分钟);

　　终止反应后30分钟内测定450nm OD值。

　　四、注意事项‌

　　样本处理‌：避免溶血或反复冻融，-70℃长期保存;

　　洗涤‌：拍干微孔板，防止残留液体干扰;

　　显色‌：底物避光保存，终止后及时检测;

　　质量控制‌：每批次实验需包含空白对照和标准曲线。

　　五、结果计算‌

　　以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过拟合方程计算样本浓度。

　　六、技术参数‌

　　灵敏度‌：批内/批间变异系数<10%;

　　检测范围‌：参考标准品梯度(如1-225 nmol/L);

　　保存条件‌：2-8℃保存，部分试剂需-20℃长期存储。

　　注：以上资料仅供参考，如需完整说明书代测服务，可联系供应商获取。

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