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以下是关于大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒实验的综合使用说明:
BS-3181 大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒
一、试剂盒组成
预包被96孔板(含CXCR3抗体)
标准品(冻干粉,需用稀释液重构)
检测溶液A/B(生物素化抗体与HRP标记亲和素)
TMB底物、终止液(硫酸溶液)
浓缩洗涤液(需20-30倍稀释)
二、样本处理
血清/血浆:采集后离心(1000×g,15-20分钟),避免溶血或反复冻融。
组织匀浆:PBS洗涤后匀浆,离心取上清。
保存条件:短期(48小时)可存于2-8℃,长期需-20℃/-80℃分装。
三、实验步骤
标准品稀释
梯度稀释法:从原液(如40ng/ml)开始倍比稀释至5-7个浓度。
加样与孵育
每孔加样50μl(样本需预稀释),37℃孵育30分钟。
洗涤
使用稀释后洗涤液,重复洗板5次,拍干。
显色与终止
加入TMB底物避光显色10-15分钟,终止后450nm测OD值。
四、注意事项
温度控制:试剂使用前需室温平衡30分钟。
避免污染:使用一次性吸头,不同批次试剂勿混用。
数据准确性:显色过深需提前终止,标准曲线需包含空白对照。
五、结果计算
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制曲线,样本浓度通过曲线拟合计算。
注:以上资料仅供参考,如需具体品牌试剂盒的差异操作(如天津本生,天正信达等),可进一步提供厂商信息以细化步骤。
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