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人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒是一种用于定量检测血清、血浆等生物样本中PⅢCP含量的科研工具,采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附技术(ELISA)。以下是关键实验说明:
BS-1719人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒
一、试剂盒组成
预包被酶标板:含捕获抗体的96孔板(可拆卸)
标准品:冻干粉需复溶,浓度范围常见78-5000pg/mL
检测抗体:生物素标记抗体及HRP标记亲和素
显色系统:TMB底物(A/B液)及终止液
浓缩洗涤液:需30倍稀释使用
二、样本处理
血清:采血后1000×g离心10分钟,避免溶血或脂血
血浆:EDTA/肝素抗凝,1000×g离心30分钟
保存:分装后-70℃冻存,避免反复冻融;解冻需室温轻缓混匀
三、操作流程
试剂平衡:所有组分需室温(18-25℃)复温30分钟
加样:
标准品梯度稀释(建议7-8个浓度点)
样本与标准品同步加入微孔板,100μL/孔
孵育:37℃温育1小时,严格控时
洗涤:拍干后加洗涤液静置30秒,重复5次
显色:
加入TMB底物避光反应15分钟
终止后立即读取450nm OD值
四、注意事项
安全防护:避免接触终止液和底物B(具腐蚀性/光敏感性)
操作规范:
使用无金属吸头防止交叉污染
酶标板开封后未用条带需密封防潮
质量控制:
批内变异系数(CV)<10%,批间CV<12%
建议做双复孔减少误差
五、结果计算
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制曲线,通过线性回归方程计算样本浓度。若样本稀释,需乘以稀释倍数。
六、应用提示
PⅢCP检测适用于肝纤维化、组织修复等研究,仅用于科研实验。建议结合其他指标联合分析。
注:以上资料仅供参考哦,不作为实际数据,具体请咨询技术老师或品牌供应商。
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