人RNA结合基元蛋白8A(RBM8A)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是关于‌人RNA结合基元蛋白8A(RBM8A)ELISA试剂盒‌的实验使用说明，综合整理自相关技术文档和产品手册：

　　BS-1656 人RNA结合基元蛋白8A(RBM8A)Elisa试剂盒

　　实验原理‌

　　采用双抗体夹心法(ELISA)定量检测样本中的RBM8A蛋白‌：

　　包被抗体‌：微孔板预包被抗RBM8A捕获抗体。

　　抗原结合‌：加入样本/标准品后，目标蛋白与捕获抗体结合。

　　检测抗体‌：加入HRP标记的检测抗体形成复合物。

　　显色反应‌：TMB底物在HRP催化下显色(蓝→黄)，颜色深度与RBM8A浓度正相关‌。

　　样本处理与保存‌

　　样本类型‌：血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆‌。

　　处理要求‌：

　　血清/血浆：离心去除颗粒(1000×g，10-30分钟)‌。

　　组织匀浆：生理盐水捣碎后离心取上清‌。

　　保存条件‌：分装后-70℃保存，避免反复冻融或溶血‌。

　　试剂盒组成‌

　　包被微孔板、标准品(浓度梯度：78-5000 pg/mL或类似范围)‌。

　　HRP标记检测抗体、TMB显色液、终止液、洗涤缓冲液等‌。

　　需自备器材‌：酶标仪(450nm)、移液器、恒温箱、蒸馏水‌。

　　操作步骤‌

　　标准品稀释‌：按说明书梯度稀释(如5000→78 pg/mL)‌。

　　加样与孵育‌：

　　每孔加入50μL样本/标准品，37℃孵育1小时‌。

　　洗涤‌：清洗未结合物质(建议自动洗板机浸泡30秒)‌。

　　显色与终止‌：

　　加入TMB显色液(避光)，37℃反应15分钟。

　　加入终止液后立即测定OD值(450nm)‌。

　　注意事项‌

　　质量控制‌：

　　批内/批间精密度CV应<12%‌。

　　标准曲线需呈线性(R²≥0.99)‌。

　　干扰因素‌：避免溶血、脂血样本及细菌污染‌。

　　适用范围‌：仅供科研使用，不可用于临床诊断‌。

　　结果计算‌

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，拟合方程计算样本浓度‌。

　　若样本OD值超出标准曲线范围，需适当稀释后重测‌。

　　注：以上资料仅供参考，如需进一步技术支持或代测服务，可联系相关供应商‌。

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