以下是关人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒的实验使用说明，综合整理自不同来源的可靠信息：

　　BS-0383人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒

　　一、实验原理‌

　　该试剂盒采用‌双抗体夹心法ELISA技术‌：

　　将捕获抗体包被于微孔板上，结合样品或标准品中的待测物IFI16p16。

　　加入生物素标记的检测抗体，形成“捕获抗体-抗原-检测抗体"复合物。

　　通过链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶(HRP)催化底物TMB显色，颜色深浅与待测物浓度成正比，最终通过酶标仪测定吸光度(OD值)计算浓度。

　　二、试剂盒组成与储存‌

　　主要组分‌：

　　包被抗体、检测抗体、标准品、HRP标记物、显色液(TMB)、终止液等。

　　储存条件‌：

　　未开封试剂盒需2-8℃避光保存;部分组分(如显色液)需严格避光。

　　有效期‌：通常为6个月，具体以标签为准。

　　三、样品处理要求‌

　　血清/血浆‌：

　　采集后室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清保存于-20℃(避免反复冻融)。

　　组织匀浆‌：

　　用预冷PBS冲洗组织，按1:9(重量体积比)匀浆，离心取上清。

　　注意事项‌：

　　避免溶血、高血脂或含NaN3的样本(NaN3抑制HRP活性)。

　　四、操作步骤‌

　　试剂准备‌：

　　标准品需现用现配，不可保存;洗涤液按1:50稀释。

　　加样与孵育‌：

　　依次加入标准品/样品、检测抗体、HRP标记物，每步需充分洗涤。

　　显色与读数‌：

　　加入TMB显色10-30分钟，终止液终止反应后，立即用450nm波长测OD值。

　　五、注意事项‌

　　安全防护‌：

　　避免接触终止液和底物(有毒)，操作时戴手套，勿用嘴吸取试剂。

　　实验细节‌：

　　加样顺序一致，避免气泡;洗涤需拍干;显色液避光保存。

　　质量控制‌：

　　每个标准品和样品建议做复孔;超出检测范围需稀释后重测。

　　六、常见问题‌

　　显色异常‌：若孔内呈绿色，表明终止液未混匀。

　　数据偏差‌：可能由样本处理、试剂批次或仪器误差引起，需重复实验验证。

　　注：以上资料仅供参考，如需更详细的操作图示或标准曲线绘制方法，可参考试剂盒附带的说明书或联系供应商获取技术支持。

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