人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是关于人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理：

　　BS-0186 人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法(或双抗原夹心法)检测样本中KGF浓度。通过包被抗体/抗原与待测物结合，再与酶标抗体形成复合物，经TMB显色后测定OD值，浓度与颜色深浅成正比。

　　二、试剂盒组成

　　主要组分‌

　　预包被微孔板(96孔或48孔)

　　标准品(冻干粉，通常含2-8管，浓度0-400 pg/mL不等)

　　酶标抗体、生物素化抗体、HRP标记亲和素(不同品牌配置差异)

　　TMB底物液、终止液(2N H₂SO₄)

　　浓缩洗涤液(需20-30倍稀释)

　　自备物品‌

　　酶标仪(450nm)、移液器及枪头

　　37℃恒温箱、蒸馏水

　　三、样本处理

　　样本类型 处理方法

　　血清‌ 室温凝固10-20分钟后，2000-3000rpm离心20分钟，避免溶血

　　血浆‌ EDTA/肝素抗凝，离心后取上清

　　细胞上清‌ 1000-3000rpm离心10-20分钟去除颗粒

　　组织匀浆‌ PBS匀浆后离心取上清，分装保存于-20℃

　　注意‌：避免反复冻融;NaN₃会抑制HRP活性，需排除此类样本。

　　四、操作步骤

　　试剂准备‌

　　标准品复溶：加入指定体积稀释液(如0.5-1mL)，静置10分钟混匀。

　　洗涤液稀释：按1:19~1:20比例用蒸馏水配制。

　　检测流程‌

　　加样：标准品/样本每孔50-100μL。

　　孵育：37℃温育60-120分钟。

　　洗板：手工或洗板机洗涤4-6次，拍干。

　　加酶标抗体：每孔100μL，37℃孵育60分钟。

　　显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。

　　终止：加入终止液后15分钟内测定450nm OD值。

　　五、注意事项

　　保存条件‌：未开封试剂盒2-8℃保存;溶解后标准品建议分装冻存。

　　精密度‌：批内CV<10%，批间CV<12%。

　　干扰因素‌：溶血、细菌污染、反复冻融可能导致假阳性或浓度偏差。

　　注：以上资料仅供参考，如需具体品牌说明可进一步提供货号查询详细参数。

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