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鸡沙门氏菌抗体(Salmonella-Ab)ELISA试剂盒实验使用说明书
BS-4399鸡沙门氏菌抗体(Salmonella-Ab)ELISA试剂盒96T/48T
一、实验原理
采用间接法ELISA技术,通过预包被沙门氏菌抗原捕获样本中的特异性抗体,再结合酶标二抗显色,显色强度与抗体浓度呈正相关。
二、试剂组成
预包被微孔板:沙门氏菌抗原包被的12×8孔可拆板条。
标准品:6瓶(0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb),需现配现用。
酶结合物:抗鸡IgG-HRP标记物。
显色液A/B:TMB底物系统,避光保存。
终止液:2M溶液,具腐蚀性。
三、操作步骤
样本处理
血清/血浆:4℃静置后1000×g离心10分钟,避免溶血。
组织匀浆:按1:9加入PBS匀浆,5000×g离心取上清。
加样与温育
每孔加50μL标准品/样本(稀释度5倍)及100μL酶结合物。
37℃避光温育60分钟,封板膜密封。
洗涤与显色
洗涤液(20×稀释)洗涤5次,拍干。
每孔加显色液A/B各50μL,37℃显色15分钟。
终止与检测
加50μL终止液后15分钟内测定450nm吸光度。
四、注意事项
安全防护:避免接触终止液和底物B,操作时戴手套。
试剂保存:2~8℃冷藏,标准品勿反复冻融。
质量控制:每样本设复孔,OD值波动范围≤15%。
五、结果计算
以标准品浓度对数与OD值拟合标准曲线,样本浓度通过曲线方程计算。
注:以上资料仅供参考,不作为实验依据,具体产品资料请咨询技术老师或品牌供应商。
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