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小鼠CD206分子(CD206)ELISA试剂盒实验使用说明书
BS-9397 小鼠CD206分子(CD206)ELISA试剂盒
一、试剂盒基本信息
检测原理
采用双抗体夹心法:预包被抗CD206抗体的微孔板与样本中的靶标结合后,加入生物素化二抗及SABC复合物,经TMB显色后测定450nm吸光度,浓度与OD值呈正比。
组分清单
预包被酶标板(8×12孔)
标准品(0.312-20ng/mL,需现配现用)
生物素化检测抗体(100×浓缩液)
TMB显色液(A/B组分,避光保存)
20×浓缩洗涤液(含防腐剂)
终止液(2M硫酸)
二、实验操作步骤
1. 样本准备
血清/血浆:采集后3000rpm离心10分钟,2-8℃保存≤48小时,长期需-80℃冻存(避免反复冻融)。
组织匀浆:按1:9比例加入PBS匀浆,4℃离心取上清。
2. 检测流程
加样:每孔加入100μL标准品或样本(建议复孔),37℃孵育90分钟。
洗涤:用1×洗涤液洗板5次,拍干。
加抗体:每孔加入100μL生物素化抗体(1:100稀释),37℃孵育60分钟。
显色:加入TMB底物避光反应15分钟,终止液终止反应。
三、注意事项
时间控制:首尾孔加样间隔≤30分钟,避免预孵育时间差异。
试剂保存:标准品需-20℃保存,浓缩洗涤液使用前需37℃助溶。
数据有效性:标准曲线R²应≥0.95,样本OD值需落在标准曲线范围内。
四、结果计算
以标准品浓度(ng/mL)为横坐标,OD值为纵坐标绘制曲线,拟合四参数方程计算样本浓度。
注:以上资料仅供参考,不作为实际数据,如需具体产品资料请咨询技术老师或品牌商。
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